发布时间 : 星期日 文章生物化学习题集更新完毕开始阅读fbebb2858762caaedd33d462
个寡肽的等电点。
（1）Asp-Gly二肽的解离情况如下：
pK1 pK2 pK3 ++-±--Asp-Gly ←→Asp-Gly ←→Asp-Gly←→Asp-Gly 2.10 4.53 9.07 pI=( pK1 + pK2 )/2=(2.10 + 4.53) = 3.3 （2）谷胱甘肽解离情况如下：
pK1 pK2 pK3 pK4 +±±---Glu-Cys-Gly←→Glu-Cys-Gly←→Glu-Cys-Gly←→Glu-Cys-Gly←→ 2.12 3.53 8.66 9.07 ---
Glu-Cys-Gly
pI=( pK1 + pK2 )/2=(2.12 + 3.53) = 2.83
14答：要计算多肽的等电点就首先应该找到净电荷为零的分子状态。在此多肽中最多可以带有30+1负电荷，正电荷为15+10+1个，相差5个电荷。要想让正负电荷相等只能让30个羧基（pK=4.3）少带5个负电荷，即在30个羧基中有25个羧基解离，5个不解离。这样，其等电点应为：
pI=pK+lg(25/5)=4.3+0.7=5.0 15答：（1）pH增加，血红蛋白与氧的亲和力增加。 （2）CO2分压增加，血红蛋白与氧的亲和力下降。 （3）O2分压下降，血红蛋白与氧的亲和力下降。
（4）2,3-二磷酸甘油酸的浓度下降，血红蛋白与氧的亲和力增加 （5）α2β2解聚成单个亚基，血红蛋白与氧的亲和力增加。
16答：氨基酸残基的平均相对分子质量为120，所以氨基酸残基数为240 000/120=2 000。已知α螺旋构象中，每个氨基酸残基上升的高度为0.15nm，β折叠构象中，每个氨基酸残基上升的高度为0.35 nm (说明，有的书上为0.36 nm)
设此多肽链中α螺旋的氨基酸残基数为x,则β构象的氨基酸残基数为2 000-x
-57
0.15x + 0.35(2 000-x) = 5.06×10cm×10 x = 970
α螺旋占分子的百分比: 970/2 000 = 48.5%
17答：测定蛋白质中二硫键的经典方法是对角线电泳。简述之：先是用专一性适中的蛋白质水解酶，将蛋白质降解为若干片段。随后进行二维纸电泳，在第一相电泳，用挥发性的还原剂处理，然后进行第二相电泳。经显色后，在多角线上的肽段均不含有二硫键，而偏离对角线的肽段是形成二硫键的肽段，测定有关肽段的氨基酸组成，即能确定蛋白质肽链中二硫键配对的情况。目前利用质谱技术也可以测定二硫键。
18答：先进行蛋白质的SDS-聚丙烯酰凝胶电泳，电泳后再进行蛋白质印迹，最后用抗体酶联检测。
19解答：赖氨酸有三个可电离的质子：
[Lys±]＝1.12[Lys]＝1.12×46.45＝52
＋
由此可见，在pH9.0时，〔Lys〕含量甚微，可以忽略不计，〔Lys〕占46.45％，〔Lys
＋－－
〕为52％，〔Lys〕为1.53％，整个分子带部分正电荷。 20解答：氨基酸从离子交换柱上被洗脱下来的速度主要受两种因素的影响：①带负电荷的树脂磺酸基和氨基酸带正电荷的功能基团之间的离子吸附，吸附力大的在树脂上停滞的时间长，从柱上洗脱下来的速度慢；②氨基酸的侧链基团与树脂强非极性的骨架之间的疏水相互作用。非极性大的侧链R基氨基酸与树脂骨架间的疏水作用力强，从树脂柱上洗脱下来的速度慢。
根据氨基酸可电离基团的pK’a值，我们可以确定题中每组氨基酸的结构以及在pH7时它们的平均净电荷。如果平均净电荷相同，则取决于它们侧链基团的疏水性。
①天冬氨酸净电荷为–l，赖氨酸净电荷为+1；赖氨酸与树脂磺酸基相反离子吸附力大。因此，天冬氨酸先被洗脱下来。
＋＋
＋
②精氨酸净电荷为+1，甲硫氨酸净电荷接近零。因此，甲硫氨酸先被洗脱下来。 ③谷氨酸净电荷为–1，缬氨酸净电荷接近零，谷氨酸的负电荷与树脂荷负电的磺酸基之间相互排斥，减小了谷氨酸与树脂的附着力，故先被洗脱下来。
④甘氨酸和亮氨酸的净电荷都接近零，但亮氨酸庞大的非极性侧链与树脂骨架之间的非极性相互作用力大。故甘氨酸先被洗脱下来。
⑤丝氨酸和丙氨酸的净电荷都接近零，但丝氨酸的侧链非极性小，故先被洗脱下来。 21解答：五肽的第一个残基是五个残基中的一个，第二个残基是余下四个残基中的一个，余此类推。因此，可能形成的五肽数目是：5×4×3×2×1＝120
22解答：在游离的氨基酸中，邻近的电荷影响每个基团的pK’a值。带正电荷的–NH3+的存
－
在，使带负电荷的–COO稳定，使羧基成为一种更强的酸．相反地，带负电荷的羧酸使–NH3+稳定，使它成为一种更弱的酸，因而使它的pK’a升高．当肽形成时，游离的α-氨基和α-羧基分开的距离增大，相互影响降低，从而使它们的pK’a值发生变化．
23解答：蛋白质的分子形状影响它在凝胶过滤时的行为。分子形状较长的蛋白质在凝胶过滤时具有类似于分子较大的蛋白的行为。用SDS-PAGE测定的蛋白质分子量应该是比较准确的，因为变形后的蛋白质的迁移速度只取决于它的分子大小。
24解答：用凝胶过滤(即分子排阻层析)法先除去分子量为100,000、pI为5.4的蛋白质，余留下来的低分子量的含酶的混合物再用离子交换层析法分离，于是就能获得所需要的纯酶。 25解答：该蛋白质具有2个亚基，每个亚基由2个大小不同的肽链通过二硫键连接而成。 25解答：普通聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质时主要是根据各组分的pI的差别。图1-8(A)的结果只呈现单一的带，表明该蛋白质是纯净的。
由于SDS是一种带负电荷的阴离子去垢剂，并且具有长长的疏水性碳氢链。它的这种性质不仅使寡聚蛋白质的亚基拆离，而且还能拆开肽链的折叠结构，并且沿伸展的肽链吸附在上面。这样，吸附在肽链上的带负电荷的SDS分子使肽链带净负电荷，并且吸附的SDS的量与肽链的大小成正比。结果是，不同大小的肽链将含有相同或几乎相同的Q／r值。由于聚丙烯酰胺凝胶基质具有筛分效应，所以，分子较小的肽链将比较大的、但具有相同的Q／r值的肽链迁移得更快。若蛋白质是由单一肽链或共价交联的几条肽链构成，那么在用SDS处理后进行SDS-PAGE，其结果仍是单一的一条带。若蛋白质是由几条肽链非共价结合在一起，在用SDS处理后进行SDS-PAGE，则可能出现两种情况：一种仍是一条带，但其位置发生了变化(迁移得更快)，表明该蛋白质是由几条相同的肽链构成，另一种可能出现几条带，则可以认为该蛋白质是由大小不同的几条肽链构成．
图1-8(B)的结果表明该蛋白质是由两种大小不同的肽链借非共价键结合在一起的寡聚体蛋白质。从图1–8的电泳结果我们可以断定该蛋白质的等电点低于pH8.2。
第三章：酶化学
一、填充题
1 全酶是由（ ）和（ ）组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中（ ）决定酶的专一性和高效率，（ ）起传递电子、原子或化学基团的作用。
2 酶活性中心往往处于酶分子表面的（ ）中，形成（ ）区，从而使酶与底物之间的作用加强。
3 T.R.Cech和S.Altman因各自发现了（ ）而共同获得1989年的诺贝尔化学奖。 4 金属离子对酶的激活作用有两种，一是作为（ ），二是作为（ ）。
5 乳酸脱氢酶有（ ）种（ ）个亚基组成。体内有（ ）种乳酸脱氢酶的同工酶，在临床诊断上有应用价值。
6 胰蛋白酶的专一性就是在（ ）残基右侧的肽键上水解；羧肽酶B专一性地从蛋白质的羧羰切下（ ）氨基酸。
7同一种酶有n个底物，就有（ ）个Km值，其中Km值最（ ）的底物，便为该酶的最适底物。
8 测定酶活力时，底物浓度应（ ），反应温度应选在（ ），反应pH选在（ ），反应时间应在反应的（ ）期进行。 9 表示酶量的多少常用（ ）表示。
10 按Michaelis公式，当V分别为0.9Vmax和0.1Vmax时，它们相应的底物浓度的比值[S]0.9/[S] 0.1应为（ ）。
11脲酶只作用于尿素，而不作用于其他任何底物，因此它具有（ ）专一性；甘油激酶可以催化甘油磷酸化，仅生成甘油-1-磷酸一种产物，因此它具有（ ）专一性。 12 双倒数作图法（Lineweaver与Burk作图），横轴截距为（ ），纵轴截距为（ ）。
13 某纯化的寡聚酶随着酶浓度降低，其配基与酶结合作用明显地增强，则最大可能是由于（ ）所造成的。
14 按照催化机制，溶菌酶、RNA酶、羧肽酶A、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶的过渡态或活性基团分别是（ ）。 15 一个有效的自杀性抑制剂必须具有（ ）、（ ）和（ ）。
16 多酶复合物体系总的反应速度取决于其中（ ）反应，一般来说大部分具有自我调节能力的多酶体系的（ ）就是限制速度的步骤。 17 酶原激活的本质是（ ）的形成和暴露的过程。
18 调节酶包括（ ）和（ ）等。解释别构酶作用机理有（ ）模型和（ ）模型两种。
19糖原磷酸化酶的活性形式及非活性形式间的平衡是（ ）磷酸化和去磷酸化，从而控制调节磷酸化酶的活性。
20蛋白磷酸化是可逆的，蛋白质磷酸化时，需要（ ）酶，而蛋白质去磷酸化是需要（ ）。
21酶蛋白可被共价修饰，如酶原激活与磷酸化，此外还有（ ）、（ ）、（ ）、（ ）等。 22以丝氨酸为活性中心的蛋白水解酶，其活性中心含有（ ），（ ）和丝氨酸组成的电荷中继网。