功能性食品-褪黑素论文 联系客服

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体通过其分泌的褪黑素来调节内分泌系统和免疫系统,并能抗氧化、清除自由基,从而起到抗衰老作用,还能对各种老年性疾病产生有益的效果。 2)褪黑素的抗肿瘤作用

治疗肿瘤或辅助治疗肿瘤:癌症病人松果体腺分泌活性普遍被抑制。补充外源性褪黑素可防止癌症的初始形成(增强免疫监视功能),尤其是预防内分泌依赖型肿瘤(乳腺癌和前列腺癌),还可加强化疗药的作用,降低其不良反应,机体存活时间延长,存活期生命质量改善。

二.生产制造工艺

2.1褪黑素的三种生产途径及对比

(1)从猪牛等牲畜屠宰后的脑垂体中提取,此法优点是原料来源稳定,但提取后杂质不易分离;

(2)利用生物工程手段将人脑中负责生产褪黑激素的基因取出,再制成“杂交瘤”嵌入大肠杆菌体内经细菌培养制得,该方法现在工艺不成熟;

(3)利用化学合成方法制备,该方法现在工艺较成熟,纯度高,所以是褪黑素的主要来源。

2.2已经工业化生产的技术路线

由对甲氧基苯胺经重氮化、氯化亚锡还原制得对甲氧基苯肼I;由四氢呋喃与氯化氢反应制得4-氯丁醇,再经氯铬酸吡啶盐氧化制得4-氯丁醛Ⅱ。I和Ⅱ经缩合环合得5-甲氧基色胺;然后乙酰化的褪黑素,反应式如下:

该法的优点:

合成路线相对较短,全部原料国内均有供应,多数反应条件温和易控制,总收率

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尚可(以4-氯丁醇计60.7%*47.6%*83.5%=24.1%)。 缺点:

1)氯化亚锡、盐酸和无水乙醚用量很大,成本高,易燃易爆,腐蚀性强; 2)氯铬酸吡啶盐氧化法易产生胶体状四价铬盐,需柱层析分离,导致生产周期长;3)缩合环合反应时间长,达24小时。[3] 三.产品检测标准 1. 国家检测标准—针对以褪黑素为有效成分的胶囊或片状包装的保健食品 2. 奶制品中的提纯和检测方法--针对含以褪黑素为有效成分的奶制品产品 3.1国家检测标准--高效液相色谱-紫外检测法[4] (1)原理

试样中的褪黑素经溶解、稀释、过滤后,使用具有紫外检测器的高效液相色谱仪检测,根据色谱峰的保留时间定性,外标法定量。 (2)试剂

去离子水/蒸馏水; 甲醇:色谱纯。; 无水乙醇:优级纯; 三氟乙酸:优级纯;

高效液相色谱流动相:甲醇:水:三氟乙酸=45:55:0.05; 褪黑素(Melatonin)标准品:Sigma公司产品。

褪黑素标准溶液的配制:精确称量30mg褪黑素标准品于100mL容量瓶中,加入70%乙醇溶解后定容。准确吸取2mL上述溶液于10mL容量瓶中,加入流动相定容,此溶液浓度为0.060mg/mL。

(3)仪器设备:高效液相色谱仪(附紫外检测器)、超声波清洗器、离心机 (4)分析步骤

1)试样处理:使用研钵将片剂或胶囊研成粉末并使之混合均匀。

2)精确称量约一粒片剂或胶囊的重量于10mL容量瓶中,以70%乙醇定容至刻度,使用超声波清洗器提取10min。将提取液离心至澄清。准确量取上清液2mL于10mL容量瓶中,以流动相定容至刻度,混匀后经0.45μm滤膜过滤后进行色谱分析。 3)测定

液相色谱参考条件:

色谱柱: C18,4.6mm×250mm。

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紫外检测器:检测波长:222nm。 流速:0.8mL/min。 柱温:室温 色谱分析:

量取10μL标准溶液及试样净化液注入高效液相色谱仪中,以保留时间定性,以试样峰高或峰面积与标准比较定量。

褪黑素标准色谱图

(5)分析结果的表述

计算:

式中:X-试样中褪黑素的含量,mg/kg;

h-试样的峰高或峰面积; hs-标准的峰高或峰面积;

c-褪黑素标准溶液的浓度,mg/mL; m-试样质量,g。 (6)技术参数

准确度:本方法的回收率在92.7%~102.6%之间。

精密度:在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5% 。

3.2奶制品的提纯和检测[5]

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(1)奶制品中褪黑素的提纯方法步骤: 1)将奶制品进行离心脱脂,过滤后得到脱脂奶; 2)将该脱脂奶按常规调整pH为4.4~4.8(调整的pH最好为4.6); 3)将步骤2)得到的产物进行离心后取乳清,8000rpm,20分钟; 4)将该乳清用不少于该奶制品3倍体积的乙酸乙酯分三次萃取; 5)萃取液去除乙酸乙酯后即得到褪黑素, 经过真空蒸发来实现。 (2)利用上述提纯方法,而对奶制品中褪黑素的进行检测的方法。 1)根据上述的提纯方法分别分离提纯需检测的样品奶及作为标准的标准奶中的褪黑素,用甲醇溶解,经高效液相色谱分离,用外标法定量,根据峰面积计算出样品奶中的褪黑素含量。 高效液相色谱分离条件: 色谱柱:Nova-Pak C18柱3.9mm*150mm; 流动相:体积比为1:1的甲醇和水; 紫外线波长:260nm; 流速:1.0ml/min; 进样量:10ul。 按照常规外标法来进行测定,包括: 2)标准曲线绘制:将标准奶的各滤液依次进样10ul,用HPLC测定各浓度相应的峰面积值,绘制标准曲线; 3)取甲醇溶解的样品奶提纯物滤液10ul注入高效液相色谱仪分离测定,以标准品峰的保留时间定性,并根据样品组分的峰面积在标准曲线上查出相应组分的含量; 4)根据标准曲线计算。 注:1.标准奶是指由褪黑素标准品溶于未含褪黑素的样品奶中所制得,所制得的标准奶中的褪黑素浓度最好分别为1.6、1.2、0.8、0.4mg/kg。 2.发明中的奶制品是指普通牛奶或用奶粉、乳清粉、稀奶油或其他牛奶组分配制成的还原奶或含乳饮料。

四.加工工艺及制得产品

4.1 一种增强免疫力、促进睡眠质量的保健药物配方[6] (1)制备工艺:

1)将远志1.5-5份、夜交藤4.5-6份、柏子仁4.5-12份分别进行粉碎,过60-80目筛; 2)取经过步骤1)获取的粉末同以下重量份数的原料进行混合:西兰花提取物6一15,褪黑素6-9,莲子心提取物4.5一10,微晶纤维素3一10;混合时间45分钟; 3)经过步骤2)混合均匀后,然后进行胶囊填充,填充过程严格按照内控标准控制胶囊填充物重量,再进行筛选、抛光、内包装,然后进行外包装,最后按检验标

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